旋光計是研究物質(zhì)旋光性的儀器,通常用于確定穿過旋光物質(zhì)的平面偏振光的旋光大小和方向,從而定量地確定旋光物質(zhì)的濃度,確定某些有機分子的三維結(jié)構(gòu)。
(1)將旋光計連接至220V交流電源,打開電源開關(guān),大約5分鐘后,鈉燈將正常發(fā)光,然后即可開始測量。調(diào)節(jié)目鏡的焦點,使視野非常清晰。當(dāng)旋轉(zhuǎn)器未配備旋轉(zhuǎn)物質(zhì)時,視場中各部分的亮度相同。
在目鏡中觀察到的中間和側(cè)面具有不同亮度和暗度的三分區(qū)視場可能具有以下條件:中間稍暗,兩側(cè)強光;中間較暗,視野兩側(cè)較亮;場的兩側(cè)都較暗,中間更亮;視野中三個區(qū)域的亮度變暗,亮度和暗度趨于相等,三點視野消失。此方法是區(qū)分三點視場的明暗度的靈敏方法,因此讀數(shù)是將分析儀轉(zhuǎn)向三點視場并消失時的讀數(shù)。整個視場都是明亮的,但是由于視場太亮,不利于確定三點視場是否消失,因此無法通過這種標(biāo)準來測量旋光度。
(2)零點校準蒸餾水是一種非光學(xué)活性物質(zhì),可以用于校準儀器的零點(即,α=0時儀器刻度盤上的讀數(shù))。校準時,清潔200mm的樣品管,將其一端密封,用蒸餾水填充,并使管口成凸?fàn)钜好妫偌右粔K玻璃蓋和一個螺帽蓋(應(yīng)(試管中沒有氣泡),但建議不要擰緊蓋子,以免壓碎玻璃。用濾紙擦拭旋光儀兩端的玻璃板,然后將它們放入旋光儀中。打開光源并調(diào)整焦點以使視野清晰。旋轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)盤先進行粗調(diào),然后再進行細調(diào)以使視場變暗。當(dāng)三點視野消失時,記下轉(zhuǎn)盤的讀數(shù),重復(fù)操作三次,取平均值。這是旋光儀的零點,稍后將對其進行測量。零點校正值應(yīng)減去或加到該值上。
(3)用與(2)相同的方法測量樣品的旋光度。
(4)注意事項旋光計的金屬部分一定不能被酸或堿污染,以避免腐蝕。每次測量之前,旋光儀周圍和兩端的玻璃板都必須清潔。實驗結(jié)束后,應(yīng)擦凈旋光儀測量罐的內(nèi)外,并用水沖洗旋光儀管并使其干燥。